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馮 毛，李建科
（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所）
摘要：蜂王漿是我國(guó)的第二大宗蜂產(chǎn)品，對(duì)我國(guó)蜂業(yè)和人類健康事業(yè)發(fā)揮重要作用。蜂王漿生產(chǎn)遍采用的方式是移蟲(chóng)后68~72h取漿，然而移蟲(chóng)后24h和48h與72h所取蜂王漿的成分和功能是否存在差異尚需進(jìn)行深入研究。通過(guò)對(duì)24h、48h和70h所生產(chǎn)的蜂王漿的成分，抑菌能力，蛋白質(zhì)組和N-糖基化蛋白質(zhì)組的分析，以及對(duì)蜂王漿主蛋白1 (MRJP1)和2 (MRJP2)的抗高血壓功效和抑制幼蟲(chóng)芽孢桿菌(Paenibacillus larvae)能力的比較研究，探究取漿時(shí)間對(duì)蜂王漿理化特征及功能的影響。移蟲(chóng)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)所取蜂王漿的水分、粗蛋白、酸度和10-HDA含量均能達(dá)到蜂王漿優(yōu)等品的國(guó)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)，雖然水分含量隨取漿時(shí)間間隔的延長(zhǎng)而顯著升高，粗蛋白、酸度和10-HDA的含量均顯著降低，但干物質(zhì)不同取漿時(shí)間差異不顯著。蜂王漿水溶液及蜂王漿水溶性蛋白質(zhì)對(duì)枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大腸桿菌(Escherichia coli)均具有顯著抑制作用，但不同取漿時(shí)間蜂王漿抑菌效果無(wú)顯著差異。3個(gè)時(shí)間點(diǎn)的蜂王漿中分別鑒定131、136和138個(gè)蛋白質(zhì)，共有蛋白有104個(gè)，其中新鑒定蛋白質(zhì)58個(gè)。3個(gè)時(shí)間點(diǎn)蜂王漿分別鑒定44、80和83個(gè)糖蛋白，各自攜帶96個(gè)、188和197個(gè)N-糖基化位點(diǎn)；其中24h蜂王漿只有N-X-V一個(gè)特征motif，而48h和70h蜂王漿的特征motif均有3個(gè)，N-X-V，N-X-T和N-X-S(X≠P)，說(shuō)明取漿時(shí)間能著影響蜂王漿N-糖基化蛋白數(shù)量、N-糖基化位點(diǎn)數(shù)、N-糖肽的特征motif，但70h蜂王漿均多于其它2個(gè)時(shí)間點(diǎn)。3個(gè)時(shí)間點(diǎn)蜂王漿糖基化修飾的MRJP1均能顯著抑制小鼠平滑肌細(xì)胞的增殖、遷移和收縮，說(shuō)明取漿時(shí)間對(duì)MRJP1抗高血壓功能無(wú)顯著影響。同時(shí)不同取漿時(shí)間的糖基化修飾MRJP2均能顯著抑制幼蟲(chóng)芽孢桿菌的生長(zhǎng)，表明取漿時(shí)間對(duì)MRJP2抑菌功能無(wú)顯著影響。糖基化MRJP2通過(guò)降低幼蟲(chóng)芽孢桿菌菌體的疏水性、對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸附能力、增加膜的通透性；同時(shí)芽孢細(xì)胞壁形成的蛋白質(zhì)和能量生成受阻，從而實(shí)現(xiàn)抑菌。研究結(jié)果表明移蟲(chóng)后不同取漿時(shí)間對(duì)蜂王漿的成分、抑菌和抗高血壓能力無(wú)顯著影響、糖基化修飾對(duì)蜂王漿蛋白功能具有重要影響，這為蜂王漿生產(chǎn)、功能成分進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
關(guān)鍵詞：蜂王漿；取漿時(shí)間；N-糖基化修飾；抗高血壓；抑菌機(jī)理
