革蘭氏染色
Gram staining
定義:用結(jié)晶紫和藏紅或品紅等染料,經(jīng)過一系列步驟將細(xì)菌染成紫色或紅色,以確定其為革蘭氏陽性菌和陰性菌兩大類的染色方法,最常用于鑒定細(xì)菌。
學(xué)科:微生物學(xué)_微生物學(xué)技術(shù)
相關(guān)名詞:革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌 肽聚糖
圖片來源:視覺中國(guó)
【延伸閱讀】
革蘭氏染色是細(xì)菌鑒定中廣泛使用的一種鑒別染色法,根據(jù)細(xì)菌的革蘭氏染色性質(zhì),可以縮小細(xì)菌鑒定的范圍。該染色法是1884年由丹麥病理學(xué)家漢斯·克里斯蒂安·革蘭發(fā)明的,最初是用來鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系,而后一些學(xué)者在其基礎(chǔ)上做了進(jìn)一步的改進(jìn)。
革蘭氏染色能夠?qū)⑺械募?xì)菌區(qū)分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩大類。革蘭氏陽性菌包括微球菌屬、葡萄球菌屬、芽孢桿菌屬、梭狀芽孢桿菌屬、乳桿菌屬、乳鏈球菌屬、棒桿菌屬、丙酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、分枝桿菌屬等屬的菌株,常見的革蘭氏陽性菌如金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌、北京棒桿菌、德氏乳桿菌等。此外,所有的放線菌均是革蘭氏染色陽性。革蘭氏陰性菌包括假單胞桿菌屬、黃單胞菌屬、醋酸桿菌屬、埃希氏菌屬、沙門氏菌屬、腸桿菌屬、變形桿菌屬、巴氏桿菌屬、里氏桿菌屬等屬的菌株,常見的革蘭氏陰性菌包括大腸桿菌、霍亂弧菌、腦膜炎雙球菌、銅綠假單胞菌等。
革蘭氏染色的差異是由細(xì)菌細(xì)胞壁的差異引起的。通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖層次較多且交聯(lián)致密,當(dāng)用乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水使網(wǎng)孔縮小。另外,它的細(xì)胞壁不含類脂,故乙醇處理后不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因而能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其呈紫色。而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,當(dāng)使用乙醇脫色處理后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖不能阻止結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因而脫色后呈無色狀態(tài)。然后用紅色染料復(fù)染,就會(huì)使革蘭氏陰性菌呈紅色。
(延伸閱讀作者:東北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院高級(jí)實(shí)驗(yàn)師 邸瑤)
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